鏈球菌及相關微生物鑒定試劑盒（比色法） 說明書

【產品名稱】 通用名稱：鏈球菌及相關微生物鑒定試劑盒（比色法） 英文名稱：API 20 Strep

【包裝規格】 25 測試/盒

【預期用途】 本產品用于測定鏈球菌（streptococci）、腸球菌(enterococci)和其它相關細菌的種或群鑒定。 臨床常見樣本來源有泌尿生殖道標本、呼吸道標本、血。該系統能鑒定的菌譜名單列于說明書后的鑒定表中。

【檢驗原理】 API 20 Strep 試條由 20 個含干燥底物的微量小管組成，能檢測酶活性或糖的發酵。 酶活性測定是以由純培養制成的濃菌懸液接種于含干燥的酶底物的微量小管中，使管內的底物溶解。在 培養期間，所產生的最終代謝產物通過自然反應或加入附加試劑而變色。 發酵試驗是接種于由含糖底物組成的培養基中。發酵的碳水化合物通過 pH 指示劑顏色的改變來檢測。 鑒定結果可根據說明書的判讀表讀出，也可參照生化檢索手冊或鑒定軟件，得到鑒定結果。

【主要組成成分】 試劑盒組成(用于 25 個測試) - 25 個 API 20 Strep 試條 - 25 個 孵育盒 - 25 個 API GP 培養基安瓿 - 25 張結果報告單 試劑條成分 API 20 Strep 試條的成分請參閱說明書后的結果判讀表。 培養基 API GP 培養基 2 mL L-胱氨酸 0.5 g 胰蛋白胨 (牛源/豬源) 20 g 氯化鈉 5 g 亞硫酸鈉 0.5 g 酚紅 0.17 g 去離子水 加至 1000 mL pH : 7.4 - 7.6 說明書中的量可能因使用原材料滴度的變化有所調整。 鏈球菌及相關微生物鑒定試劑盒（比色法） 版本號 07625L-zh– 2010/07 2 需要但沒有提供的試劑和設備 試劑/儀器： - API○R 懸浮培養基， 2 mL (Ref. 70 700) - 試劑： NIN (Ref. 70 491) VP 1 + VP 2 (Ref. 70 422) ZYM A (Ref. 70 494) ZYM B (Ref. 70 493) - 礦物油 (Ref. 70 100) - McFarland 標準比濁管 (Ref. 70 900) MCF 4 或光度計 DENSIMAT (Ref. 99 234) - API 20 Strep 數值分析索引 (Ref. 20 690)或鑒定軟件 (請于生物梅里埃公司聯系） - 哥倫比亞血瓊脂平板 (Ref. 43 041) - Schaedler 肉湯培養基 (選用) 材料： - 拭子 - 吸管或 PSI 管 - 安瓿架 - 安瓿保護套 - 厭氧瓶 - 微生物實驗室常規設備

【儲存條件及有效期】 2～8°C 保存，有效期為 12 個月。 生產日期：詳見外包盒標簽。 失效日期：詳見外包盒標簽。

【適用儀器】 - McFarland 標準比濁管 (Ref. 70 900) MCF 4 或光度計 DENSIMAT (Ref. 99 234) - API 20 Strep 數值分析索引 (Ref. 20 690) 或 鑒定軟件 (請于生物梅里埃公司聯系）

【樣本要求】 API 20 Strep 不能直接用于臨床或其他標本（例如泌尿生殖道標本、呼吸道標本、血標本等等）。 需要鑒定的微生物必須首先根據微生物標準規程在合適的培養基上進行分離。

接種物的制備 

? 按產品說明書中“警告和注意"所示，打開 API 懸浮培養基安瓿。

? 用拭子收集所有先前準備好的傳代平板上的細菌。建議使用培養 24-48 小時的新鮮菌。.

? 制備菌懸液，濃度為 6 個麥氏單位。菌懸液制備好后應立即使用。

試條的接種 

? 試條前 11 個試驗 (從 NIT 到 GEL ) 加入菌懸液， 注意避免氣泡 (將培養盒稍前傾，吸管和 PSI 管的吸頭

靠住杯的內緣，菌懸液沿管壁滴入杯內。) ：

- 從 NIT 到 ESC：每個杯中加入約 100-150 µl 菌懸液。

- URE ：只加滿管的部分

- GEL ：管和杯都加滿

? 試條最后 9 個試驗 (從 0 到 GLYG)：

- 按產品說明書中“警告和注意"所示，打開一支 API GP 培養基，倒入余下的菌懸液(約 0.5 ml)。混合均

勻。

- 將新的菌懸液加入每個小管中（只加管部）

? 在有下劃線的試驗的杯中(URE, 和 0 到 GLYG) 加入礦物油，形成新月狀凸起。

? 蓋上蓋子

? 在有氧環境中，36°C ± 2°C 孵育 24 小時(? 2 小時) 

試條判讀

孵育后：

? 加入試劑：

- NIT 試驗：各加一滴 NIT 1 和 NIT 2

- PYZ 試驗：加入 1 滴 PYZ

- PyrA,PAL,?GUR,?GAL,?GLU 和 ?NAG 試驗：各加一滴 ZYM A 和 ZYM B （*）

- 等待 10 分鐘，然后根據判讀表讀所有的結果。如有必要，讓試條暴露在強光下 (1000 W) 10 秒鐘，使 PyrA

到 ?NAG 管內多余試劑退色。

（*）建議在使用前控制每個 ZYM B 安瓿。

為了消除任何缺陷試劑，建議按照質控章節所述應用 ATCC○R27402 菌株進行質量控制檢測。

? 進行觸酶試驗 (作為第 21 測試)：在 ESC 或 GEL 測試中加入一滴過氧化氫 (3 %) ，等一分鐘。產生氣泡

即為陽性。

? 將結果記錄到結果報告單上

? API Coryne 系統只應用于包括在數據庫內的棒狀桿菌屬或相關的屬的鑒定（參說明書末的鑒定表）。不能

用於鑒定或排除鑒定范圍之外的菌種。產品數據庫僅限于臨床標本中最常見的棒狀桿菌。

? 此方法只能用于單個細菌的純培養物的鑒定。

? 某些情況下， API Coryne 試條的生化反應不足以鑒別兩種菌時，必須進行補充試驗，這種情況會出現一個注

解。在分析圖譜索引和技術手冊的 "鑒定軟件相關生化信息"內有試驗說明和文獻參考。

? 如果細菌鑒定為白喉棒狀桿菌（C. diphtheriae）, 必須做過敏毒素試驗確定該菌株為致病菌。